胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗的构建和实验研究

【作者】 吴文川； 靳大勇； 秦新裕；

【机构】 复旦大学附属中山医院普外科胰腺组；

【摘要】 <正> 目的:构建胰腺癌MUC1-VNTR核酸疫苗,研究疫苗所诱生的免疫应答,以进一步研究疫苗对胰腺癌的治疗作用。方法:将人工合成的重组人VNTR基因定向克隆人真核表达载体pcDNA3.1/Mychis（+）A质粒的MCS中构建胰腺癌MUC1-VNTR的核酸疫苗。以100μg质粒DNA肌注免疫C57BL/6（H₂^b）小鼠,3周后再次免疫,2周后取血测抗VNTR抗体,取脾细胞体外以VNTR合成肽特异刺激,6天后进行杀伤试验。结果:测序表明pcDNA3.1-NVTR/Myc-his（+）A重组质粒含有完整正确的阅读框架和目的基因。重组质粒可在COS7细胞内外表达VNTR。重组质粒免疫的小鼠脾更多还原