结核分枝杆菌inhA基因的克隆、表达及蛋白作用的初步研究

【作者】 陈澍； 翁心华； 张文宏； 庞茂银；

【机构】 复旦大学医学院附属华山医院传染病教研室；

【摘要】 <正>目的:对结核分枝杆菌H37Rv的inhA基因进行克隆、表达并纯化表达产物,并对其与NADH的相互作用进行研究,为进一步探索异烟肼的作用机制、耐药机理提供理论与实验依据.方法:以PCR法扩增结核分枝杆菌H37Rv的inhA基因,构建含inhA基因的表达质粒pET-24b/in-hA;重组质粒经酶切鉴定和测序检验后转化大肠杆菌BIZ1(DE3).然后以异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)诱导含重组质粒的大肠杆菌共4小时,其间每隔1小时取1ml菌液以SDS-PAGE检测蛋白表更多还原