仙灵骨葆对卵巢切除大鼠骨组织形态学的影响

【作者】 沈培芝； 徐宇； 赵咏芳； 石印玉；

【机构】 上海中医药研究院骨伤科研究所；

【摘要】 目的:通过建立骨质疏松症的动物模型,筛选有效治疗药物,观察临床初步验证有效的中药制剂仙灵骨葆胶囊对去势大鼠骨组织形态学的影响,了解仙灵骨葆胶囊在恢复骨结构方面的作用.方法:40只10月龄雌性SD大鼠,平均重量为300g,随机分为A、B、C、D 4组;A组10只,为假切除组;B组10只,为模型组(切除双侧卵巢);C组10只,为中药治疗组,进行双侧卵巢切除术并于术后3月给予中药仙灵骨葆胶囊治疗;D组10只,为倍美力组,进行双侧卵巢切除术并于术后3月给予阳性治疗药物倍美力治疗.每只大鼠均于术后6月取材,取右侧胫骨,放入10%福尔马林中固定,脱钙,石蜡包埋,制备切片,沿胫骨矢状面切10um厚度切片,HE染色,在Olympus光镜下观察骨小梁的形态结构;取第一腰椎标本,2%的戊二醛溶液固定,醋酸异戊酯保存,二氧化碳临界点干燥,真空喷金,在JMS-840扫描电镜上观察骨小梁的形态结构;取左侧胫骨,Millonig’s液体固定,甲基丙烯酸甲酯包埋.在Polycnt-s型硬组织切片机上切片,沿胫骨矢状面切10um厚度切片.切片做甲苯胺蓝染色,参照Parfitt等人骨小梁参数计量方法,借助VIDAS图象分析系统进行测量,参数包括骨小梁的体积(TBV)骨小梁的宽度(Th.T)、骨小梁的间隙(Th.S).结果:假切除组骨小梁排列密集,小梁之间连接成网状结构,小梁的厚度宽,小梁间距小;切除卵巢以后大鼠骨小梁明显稀少,同样倍数下骨小梁的连接中断点多,小梁明显变细,小梁的间距加宽,甚至在部分区域出现较大的空白区域;应用仙灵骨葆治疗以后,骨小梁排列密集,小梁的连接明显增加,小梁厚度增宽,小梁之间的间隙变窄,三维结构得到恢复,与假切除组、倍美力组的病理表现类似.骨形态计量学结果示,模型组单位体积内内小梁的减少,小梁厚度变窄,小梁间距加宽,与假切除组比较有显著性差异;应用仙灵骨葆治疗以后,单位体积内的小梁量明显增加,小梁厚度明显加宽,与假切除组和倍美力组比较无差异;但小梁之间的间距并未变窄,与切卵组比较无统计学差异.结论:应用仙灵骨葆治疗以后,骨小梁三维结构得到一定程度的恢复,但难以恢复到骨质疏松症以前的结构状态.更多还原