真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin的构建及其在神经胶质瘤细胞内的表达

【作者】 张丽英； 李青； 陈广生； 林圣彩； 叶菁； 司少燕； 张丰；

【机构】 第四军医大学西京医院病理科； 厦门大学生命科学学院；

【摘要】 目的构建真核表达载体plRES2-EGFP-Axin,并在神经胶质瘤细胞系C6中进行表达。方法用PCR的方法扩增Axin基因,构建真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin,经NheⅠ及SalⅠ双酶切鉴定并测序。通过脂质体法转染C6细胞,用荧光显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,用免疫组化染色的方法检测细胞中Axin的表达。结果成功地构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-Axin,用脂质体法转染神经胶质瘤细胞C6后,经荧光显微镜利免疫组化染色法检测,可见细胞内有EGFP及Axin的表达。结论成功地构建真核表达载体plRES2-EGFP-Axin,并在神经胶质瘤细胞C6中表达,为研究Axin对肿瘤的生物学作用以及Axin在肿瘤基因治疗中的应用奠定了基础。更多还原