hsMAD2基因及Nocodazole对人肝癌细胞生长和细胞周期的影响

【作者】 李擒龙； 王文亮； 张晓晖； 晏伟； 成胜权； 郭双平； 张志培； 王丽； 严晓昱； 张静；

【机构】 第四军医大学病理学教研室肿瘤生物学国家重点实验室；

【摘要】 目的观察hsMAD2过表达以及联合Nocodazole处理对HepG2细胞的生长和细胞周期的影响。方法将人全长hsMAD2基因经脂质体包裹转染肝细胞肝癌HepG2细胞,经G418筛选获得转基因癌细胞克隆,采用免疫细胞化学法、Western Blot方法检测hsMAD2的表达情况。观察细胞形态、测量生长曲线和分裂指数曲线,观察hsMAD2基因对HepG2细胞生长和细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检HepG2细胞周期的变化。然后观察在纺锤体阻滞剂50nM-nocodazole作用下,hsMAD2对HepG2细胞的影响。结果稳定表达外源性hsMAD2蛋白的HepG2细胞生长速度和细胞增殖能力并无显著性变化:流式细胞仪检测结果HepG2-hsMAD2细胞周期G2期、S期比例增加,而C1期细胞比例下降,但是差异无显著性。经过nocodazole处理后,HepG2-hsMAD2细胞生长速度下降,差异具有显著性,细胞周期出现G2期阻滞。相对地,HepG2在受到Nocodazole处理后无明显变化。结论单纯过表达外源性hsMAD2对细胞无明显影响。由于hsMAD2蛋白发挥了关卡作用,使受到Nocodazole破坏作用的细胞出现细胞周期的阻滞。更多还原