【作者】 叶晓川； 李文媛； 毛成文； 蔡汝秀； 徐辉碧； 杨祥良；

【Author】 Xiaochuan Ye~1 Wenyuan Li~1 Chengwen Mao~1 Ruxiu Cai~2 Huibi Xu~1 Xiangliang Yang~1 (1.Institute of Materia Medica,College of Life Science and Technology,Huazhong University of Science and Technology,Wuhan 430074,China; 2.College of Chemistry and Molecular Sciences,Wuhan University,Wuhan 430072,China

【机构】 华中科技大学 生命科学与技术学院药物研究所； 武汉大学化学系；

【摘要】 雷公藤内酯醇(Triptolide,TP)是一种生理活性显著的化学物质,但由于其具有明显的毒副作用,在临床上的应用受到了极大的限制。大量研究结果表明,药物的代谢产物与其活性及毒性密切相关,同时许多药物既是药物代谢酶的底物,又是代谢酶的诱导剂或抑制剂。因此,弄清雷公藤内酯醇的药物代谢过程及其对药物代谢酶的影响将对阐明雷公藤内酯醇的毒性机制具有重要的意义。本文建立了一个简单、快速、准确的测定大鼠肝微粒体中雷公藤内酯醇含量的高效液相方法,采用差速离心法制备大鼠肝微粒体酶,TP与大鼠肝微粒体进行温孵,以HPLC法测定孵育液中TP原形药物的浓度并计算出TP代谢量,研究雷公藤内酯醇在细胞色素P4501A、3A诱导剂3-甲基胆蒽、地塞米松处理的大鼠以及对照组大鼠的肝微粒体中代谢的酶动力学,并探讨不同浓度和不同种类的CYP450抑制剂对TP代谢的影响及参与其代谢的CYP酶。结果显示:所建立的含量测定方法线性范围为1.98～158.20μg/mL,日内及日间精密度分别为6.2%和7.1%,不同浓度的回收率为97.2到100.2%;TP在大鼠肝微粒体中代谢产生4个产物,在经不同药物处理的大鼠肝微粒体中的代谢均符合Michaelis-Menten方程,3-甲基胆蒽或地塞米松诱导的大鼠肝微粒体中TP的代谢速率明显高于对照组,Vmax分别为对照组的3.45和9.58倍,表明CYP1A和CYP3A参与了TP的代谢;CYP1A2抑制剂非那西丁、CYP2C9抑制剂氟康唑和CYP3A4抑制剂酮康唑可以显著地抑制雷公藤内酯醇的代谢,使雷公藤内酯醇的代谢速率下降,而其它CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1特异性抑制剂对雷公藤内酯醇的代谢没有明显的影响。证明CYP1A和CYP3A参与了TP的代谢,CYP2C也可能是参与TP代谢的一个P450酶亚型。更多还原

【Abstract】 Extracts of Tripterygiurn wilfordii (Lei gongteng) roots have a long history of use in tra- ditional Chinese medicine.The major active and toxic component of Tripterygium root extracts is the diter- penoid triptolide.In this paper,a simple,rapid and accurate method was developed for the determination of triptolide in rat liver microsomes by using high-performance liquid chromatography.The developed method was successfully applied to the study on metabolism kinetics of triptolide in rat liver microsomes in vitro.The results suggested that the metabolism of triptolid in various rat liver microsomes followed Michaelis-Menten kinetics equation.,and cytochrome P450 1A,2C and 3A may be the isoforms of CYP which participate in triptolide metabolism in rat liver mierosomes.更多还原