实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞MMP-1及TIMP-1基因的表达

【作者】 张健珍； 张春兰； 胡赋； 易俊卿； 陈厚志； 杨湛；

【机构】 广东省广州市第八人民医院； 中山大学达安基因中心；

【摘要】 目的:应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)内基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)基因的表达。方法:提取 PBMC 总 RNA 并逆转录为 cDNA,采用 FQ-RT-PCR 方法分别检测37例慢性乙型肝炎患者及20例正常对照的 PBMC 内 MMP-1及 TIMP-1mRNA 的表达水平,同时37例慢性乙型肝炎患者均行肝穿刺活检,病理组织进行纤维化程度分期(S)。结果:正常对照组 PBMC 内存在 MMP-1mRNA 及 TIMP-1mRNA 的表达,慢性乙型肝炎患者 PBMC 内 MMP-1mRNA 表达水平与正常对照组比较无统计学差异,而 TIMP-1mRNA 表达水平显著高于正常对照组;随着慢乙肝肝纤维化程度加深,各期之间 MMP-1mRNA 的表达水平无统计学差异(X~2 =8.960,df=4,P=0.111);而 TIMP-1mRNA 表达水平逐渐升高,且 TIMP1-mRNA/MMP-1mRNA 比值逐渐升高, 各期之间 TIMP-1mRNA 的表达水平及 TIMP1-mRNA/MMP-1mRNA 比值有统计学差异(分别为 X~2=14.2908, df=4,P=0.002;X~2=12.209,df=4,P=0.007)。结论:外周血 PBMC 内 MMP-1mRNA 表达水平与肝纤维化程度无明显相关性,而 TIMP-1mRNA 的表达水平与肝脏纤维化程度密切相关,PBMC 内 TIMP1-mRNA 水平及 TIMP1-mRNA/MMP-1mRNA 比值可以作为诊断肝纤维化的新指标;但能否作为早期诊断的敏感指标,仍需要临床大量试验证实。更多还原