人三叶因子2基因治疗对实验性大鼠胃溃疡愈合的影响

【作者】 宋于刚； 张绍荣； 陈学清；

【机构】 南方医科大学南方医院；

【摘要】 目的:1、观察局部单次大鼠粘膜下注射pcDNA3．1(+)-hTFF2对火鼠冰乙酸实验性胃溃疡的愈合是否有促进作用;2、从胃酸分泌、胃粘膜上皮细胞增殖以及溃疡底部微血管形成的角度探讨hTFF2对促进胃溃疡愈合的可能机制:方法1、将48只Wistar大鼠随机分为治疗组和对照组。应用冰乙酸法制作大鼠慢性胃溃疡模型,治疗组24只应用pcDNA3．1-hTFF2 100 μg／只,在造模时经胃壁粘膜下注入。对照组24只应用等容积pcDNA3．1 100μg／只,在造模时经胃壁粘膜下注入。2、术后第3日第7日第14日处死治疗组和对照组各8只大鼠计算溃疡面积。3、取胃液用0．01 mol/L氢氧化钠进行总酸滴定,计算胃液总酸度。 4、取包括溃疡底部和边缘在内的3 mm×5 mm组织条,行免疫组化染色检测细胞增殖指数和微血管生成的检测。5、分别取溃疡及溃疡旁胃组织各约150 mg提取蛋白质,用于Western Blotting检测。结果1．对治疗组和对照组第3日、7日、14日溃疡面积进行分析,组间比较有显著性差异(F=5．654 P=0．032),制模术后第14日,治疗组和对照组的溃疡面积分别是9．58±3．12 mm2和17．03±2．23mm2,两者有显著性差异(p=0．000)。2、对治疗组和对照组第3日、7日、14日胃总酸度进行分析,组间无显著性差异(F=0．307 P=0．588)。3、对治疗组和对照组第3日、7日、14日上皮细胞增殖指数进行定量分析显示,组间有显著性差异(F=31．422 P=0．000)。制模术后第7日,治疗组和对照组PCNA LI分别为25．71±2．62％和19．67±2．86％两者相比差异有显著性(P=0．001)。制模术后第14日,治疗组和对照组PCNA LI分别为36．21±3．81％和 28．53．67±2．84％(P=0．005),两者相比有显著性差异4．对制模术后第7日和第14日溃疡底部肉芽组织中的微血管进行了定量分析,溃疡底部微血管数量组间差异有显著性(F=10．775 P=0．005)。制模后第7日, 治疗组和对照组微血管数量分别为31．54±3．61个／视野和26．34±4．94个／视野,两组相比有显著性差异 (P=0．028)。制模术后第14日,治疗组和对照组微血管数量分别为39．36±3．69个／视野29．93±4．15个／视野,两者相比差异有显著性(P=0．000)5、wstern-blot检测胃组织内hTFF2蛋白的表达,发现治疗组第 3日,第7日第14日均有表达;而对照组第3天、第7天、第14天均无表达结论1、pcDNA3．1-hTFF2基因治疗对大鼠胃溃疡愈合有促进作用。2．pcDNA3．1-hTFF2基因治疗对溃疡愈合的促进作用与胃酸分泌因素无关。3．pcDNA3．1-hTFF2基因治疗对溃疡愈合的促进作用与促进细胞增殖和增加溃疡底部的微血管形成及有关。更多还原