内蒙古一迟发型先天性厚甲家系的K17突变研究

【作者】 冯义国； 任小蓉； 肖生祥； 王俊民； 谭升顺； 李利； 史耀舟；

【机构】 西安交通大学第二医院皮肤科； 内蒙古阿鲁科尔沁旗医院皮肤科； 中国科学院上海生物工程研究中心；

【摘要】 目的:检测这一迟发型先天性厚甲的角蛋白17的基因突变,并探讨基因突变和表型的关系。临床资料和方法:该家系四代共有19例患者,具有明显的厚甲、多发性脂囊瘤和局灶性掌跖角化等先天性厚甲的特点。厚甲的发生时间在10-20岁左右,符合迟发型厚甲。抽取该家系中9例患者、1例正常人及与该家系无关的50例正常人的外周血5ml,提取DNA,用引物K17p8(5’-GCCTATAAAGGAAGCGGGC-3’)和引物K17p10(5’-CTCCTTTCTGCCTCCTCCT-3’)选择性扩增K17基因外显子1及其侧翼序列:PCR产物稀释后作为巢式PCR的模板。巢式PCR的引物为:上游引物序列为:5’-GGCTGCTAGCTTTGGCTCT-3’;下游引物序列为5’-CACGACGTTGTAAAACGACCAGTCACGGATCTTCACC-3’。其产物直接进行DNA测序,然后进行同源性分析。结果:直接测序结果发现患者的第90位密码子由AAC突变为AAG,结果导致天冬酰胺由赖氨酸替代(即N90K)。而该家系中的正常人及与该家系无关的50例正常人的DNA测序结果均未发现此突变。结论:我们发现的突变为角蛋白K17的N90K突变,为一新的错义突变。目前,报道的所有突变均位于1A区结构域的起始部,此处的氨基酸替代可导致α-螺旋结构的扭曲,从而影响中间丝蛋白的形成和装配。新近,ConnorsJB等报道了首例6岁时出现厚甲的迟发型PC-Ⅰ型患者,其基因突变位于K16的2B区。他们推测厚甲的迟发是突变位置决定的。而我们报道的这一PC-Ⅱ家系,厚甲均为迟发(15-20岁发生),而基因突变位于K17常见的1A区。因此,角蛋白基因突变的位置可能不是PC-Ⅱ厚甲发生年龄的唯一决定因素,可能还存在其他遗传或环境因素决定厚甲发生的年龄。我们的研究为先天性厚甲的迟发与基因突变位置是否有关提供了新的资料。更多还原