Smad7基因沉默对细胞增殖的影响

【作者】 霍艳英； 王莹； 张开泰； 王莉； 项晓琼； 胡迎春； 徐勤枝； 李刚； 米粲； 吴德昌；

【机构】 军事医学科学院放射医学研究所四室；

【摘要】 <正> 目的:Smads蛋白家族在转化生长因子β(transforming growth factor-βs,TGF-βs)家族信号通路中发挥不同的作用,参与调控细胞的增殖、转化和凋亡。其中,Smad7具有与其它信号分子不同的负性调控作用,Smad7功能紊乱是TGF-β信号通路紊乱的机制之一。本研究旨在探讨Smad7基因沉默对细胞恶性转化进程的影响。方法:利用RNAi技术,设计并合成了针对Smad7基因的SiRNAs,用基因转染的方法瞬时转染BEP2D和BERP35T2细胞系,用Northern blot法检测RNAi效应。在此基础上,用MTT法检测Smad7基因沉默后对细胞增殖能力的影响和对TGF-β1介导的生长抑制效应的影响,并用流式细胞技术检测Smad7基因沉默后对细胞凋亡有无影响。结果:对永生化及恶性转化的人支气管上皮细胞系BEP2D和BERFJ5T2,RNAi能明显抑制Smad7基因的表达;Smad7基因沉默细胞的增殖能力明显低于对照,同时,TGF-β1对Smad7基因沉默细胞的生长抑制作用增强;Smad7基因沉默对该细胞系的凋亡无明显影响。结论:Smad7基因沉默后,该基因对TGF-β信号通路的抑制作用消失,使TGF-β1介导的对细胞的生长抑制作用恢复,细胞增殖能力减弱。更多还原