ZDY101对CHOm2细胞M2受体mRNA稳定性的调节

【作者】 胡雅儿； 夏宗勤；

【机构】 上海第二医科大学药物研究所细胞调控研究室；

【摘要】 <正> 目的:研究中药知母中提取的有效成分ZDY101提高M2受体是否通过对M2受体mRNA基因稳定性表达的调控而实现的。方法:转染M2受体cDNA的CHOm2细胞用MEM培养基培养24h后加ZDY101(10^-5mol/L)或溶媒DMSO,然后不同时间（24～96h）收集细胞,观察药物作用的时相变化,M2受体密度测定用³H-NMS放射配基结合法,mRNA含量用定量RT-PCR测定。测定m2 mRNA半衰期时,CHOm2细胞经ZDY101或溶媒处理48h后,用PBS洗,再加放线菌素D（5μg/ml）继续培养,阻断转录,不同时间（0h～12h）用定量RT-PCR测定m2 mRNA。以时间为横坐标,m2 mRNA含量的对数为横坐标,得到一条直线,斜率除以0.693等于m2 mRNA的半衰期。结果:1)ZDY101对M2受体密度的调节作用。虽然细胞随培养时间延长而老化,导致M2受体密度逐渐降低,但ZDY101组的下降速率远更多还原