雷公藤内酯醇对大鼠心脏微血管内皮细胞凋亡的影响

【作者】 何靖康； 顾振纶； 周文轩； 郭次仪；

【机构】 苏州大学医学院药理学教研室苏州中药研究所； 香港保健协会；

【摘要】 <正> 目的:研究雷公藤内酯醇（TRI）对大鼠心脏微血管内皮细胞凋亡的影响。方法:培养分离大鼠心脏微血管内皮细胞,建立内皮细胞缺氧再给氧模型,将实验细胞分为常氧对照组（N,正常给氧,不给予任何其他刺激）;缺氧组（H,缺氧15h）;缺氧/再给氧组（H/R,缺氧15h/再给氧24h）;TRI组（H/R+TRI）和PDTC对照组（H/R+PDTC）。TRI设2.5、5、10μg·L^-1三个剂量组。观察不同的刺激组对培养内皮细胞数量的变化。用二苯胺法分别测定上清液及沉淀物中DNA的含量,计算细胞DNA断裂百分率（上清液DNA含量/上清液和沉淀液中DNA含量之和）,通过凝胶电泳迁移率（EMSA）测定内皮细胞NF-κB的活性,用原位缺口末端标记（TUNEL）技术检测内皮细胞的凋亡,Western Blot分析测定内皮细胞bcl-2和bax的蛋白表达,Northern Blot在分析检测内皮细胞bcl-2mRNA表达。结果:大鼠心脏微血管内皮细胞在缺氧再给氧刺激后,内皮细胞数量明显减少,DNA断裂碎片增加,NF-κB活性显著增加,内皮细胞凋亡数量增加,bcl-2表达明显下降,bax蛋白表达无明显改变;TRI处理更多还原