肌醇合成的调控与天蓝色链霉菌分化关系的研究

【作者】 张国华； 田宇清； 谭华荣；

【机构】 中国科学院微生物研究所；

【摘要】 前期工作表明,天蓝色链霉菌分化调控关键因子 WhiI 在分化进程中影响一系列基因的表达,其中在基因组上毗邻的 inoR(编码 padR 类负调控基因)和 inoiL(编码肌醇-1-磷酸合成酶,为肌醇合成的限速酶)可能是其所控制的靶基因,对 inolL 的研究表明,肌醇很可能是天蓝色链霉菌形态分化过程中不可缺少的因子,这是首次发现肌醇参与原核生物的发育分化,但肌醇如何影响到形态分化及其合成的调控机制仍然未知,本研究即是探索肌醇合成调控的分子机制。在野生型菌株中诱导高表达 InoR,产生了类似于 inolL 破坏株的光秃表型, 在培养基中添加肌醇后,光秃表型又可以回复到野生型,说明 inoR 可能负调控 inolL。对野生型菌株进行 inolL 转录分析表明,inolL 不单自身存在启动子可以起始转录,同时由其上游基因 inoR 起始的转录亦能通读 inolL,且两个转录信号都随分化进程受到调控。表明 InoR 有可能通过对自身启动子的结合对 inolL 进行调控。而通过 InoR 与其自身启动子 PinoR 的 EMSA 分析表明,InoR 同 PinoR 具有多种结合构型,很可能暗示了 InoR 对自身转录存在精细调控。通过在 inoR 内部插入卡那霉素抗性基因对其进行阻断,因卡那霉素抗性基因插入方向的不同. inoR 突变株显示了不同的表型。为消除插入的卡那霉素对其下游基因表达的影响,在基因组原位构建了 inoR 的移码突变株,以期通过对突变株中 inolL 的转录及对突变株中 InolL 蛋白的检测来揭示 InoR 是如何对其编码基因下游的 inolL 进行精细调控的,目前的相关研究正在进行中。更多还原