鱼类精子mRNA的分析与鉴定

【作者】 郑康； 罗琛；

【机构】 湖南师范大学生命科学学院发育生物学研究室；

【摘要】 <正>近来的研究结果表明,人类精子在受精过程中传递给卵子的不仅仅是DNA,还包括为数众多的 mRNA,反义RNA和miRNA。其中精子mRNA中大量转录因子的发现与鉴定,进一步暗示了这些 RNA与受精后受精卵中发生的一系列的事件有着密不可分的联系。进行精子RNA的鉴定和功能分析对全面深入了解两性生殖过程具有重要意义。目前还很少见到关于鱼类精子RNA的报道。由于绝大多数鱼类的两性生殖过程是在体外进行的,且胚胎数目庞大,从受精一开始就可以进行胚胎发育的观察和胚胎材料的提取,所以鱼类与哺乳类相比更有利于进行精子RNA在胚胎早期发育过程中的功能的研究。因此我们选择鱼类精子 mRNA作为研究对象。本实验以鲤鱼精子总。RNA为模板,用oligo dT为锚定引物,合成cDNA,再用随机引物进行 PCR扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳回收共得到31个片段。对这些片段的测序分析确认了6个编码蛋白质的mRNA,其中一个编码58个氨基酸短肽的mRNA是一个功能未知的新基因。这些结果表明: 与人类精子相似,鱼类成熟精子中同样存在较多的mRNA;精子在受精过程中不仅能启动卵子的发育和提供一个单倍体的基因组,而且可能在合子基因的表达调控过程中起某种重要的作用。更多还原