体外诱导人脐血CD34~+细胞向肝细胞的分化

【作者】 张芳婷； 叶静； 龙霞； 万汇涓； 于洁； 房家智；

【机构】 北京大学深圳医院中心实验室；

【摘要】 <正>目的:探讨在体外培养条件下人脐血CD34+细胞向肝细胞分化。方法: 用磁性免疫分离器分离出CD34+细胞后,经流式细胞仪检测纯度后,在DMEM+5％FBS中培养,并以FGF4、HGF进行诱导。分别于生长因子刺激前和刺激7d、14d时留取细胞。通过RT-PCR对ALB、AFP、GATA-4 等蛋白mRNA的表达水平进行检测;用免疫细胞化学染色方法检测ALB的表达情况,并收集培养液上清测定ALB的含量。结果:流式细胞仪检测结果显示CD34+细胞的平均分离纯度>90％。RT-PCR 结果显示CD34+细胞在生长因子诱导前不表达ALB、AFP、GATA4,诱导7d后AFP蛋白mRNA表达量最高,14d表达量减少。而ALB、GATA-4蛋白mRNA表达量从7d到14d递增。免疫细胞化学染色可见ALB阳性表达细胞,ELISA检测表明CD34+细胞经诱导后培养液上清中的ALB含量明显增高,与诱导前相比差异显著(p<0．01)。结论: 在体外培养条件下,脐血CD34+造血干细胞能分化为肝细胞。更多还原