钙调蛋白促进Polo-like激酶1对G2／M转换的调控

【作者】 戴谷； 王毅谦； 潘飞燕； 王盛； 陈洁； 李朝军；

【机构】 南京师范大学生命科学学院分子医学生物技术江苏省重点实验室；

【摘要】 <正>G2／M转换是细胞周期核分裂中的一个关键的检验点,前期的研究表明,钙调蛋白 (Calmodulin,CaM)对细胞顺利通过该检验点的监视,完成细胞周期的正常运转具有重要调节作用。我们通过生物信息学筛选发现Polo Like激酶(Plk1)可能是一种CaM下游效应分子的候选蛋白质。通过分析显示Plk1具有三个潜在的CaM结合结构域,其中一个位于与定位密切相关的C端Polo盒内,两个位于N端的催化区。我们的结果显示,CaM和Plk 1在细胞分裂中期发生共定位。免疫荧光染色发现CaM和Plk1在细胞分裂中期主要共分布于纺锤体两极的微管组织中心处;免疫共沉淀及Western Blotting 的结果亦显示在细胞有丝分裂中期,CaM和Plk1两者可以互相被对方所共沉淀。 CaM对Plk 1的活性起着调控作用。Plk1的活性在细胞周期的G2／M转换期达到最高,用CaM的抑制剂处理同步化在此时的细胞可以抑制Plk1的活性。与对照细胞系相比,稳定表达CaM的细胞系具有较高的Plk1的活性。在HEK293细胞中过量表达突变型的CaM无法使Plk1的活性上升。更多还原