检测PCV2、PPV、PRV、PRRSV的多重PCR诊断方法的建立及初步应用

【作者】 岳丰雄； 崔尚金； 戚亭； 周盛华； 冉多良； 张超范；

【机构】 中国农科院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室； 新疆农业大学动物医学学院；

【摘要】 本文建立了一种能够同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖呼吸道综合征病毒(PRRSV)的多重PCR诊断方法(Multiplex PCR,mPCR)。设计了4对引物分别用于扩增PCV2 ORF2 353 bp、PPV NS1271 bp、PRRSV MN 434 bp、PRV gB 194 bp的目的片段。特异性实验表明,建立的多重PCR诊断方法对猪瘟(CSFV)、大肠杆菌(Escherichia coli)和双蒸水的PCR扩增结果均为阴性。敏感性实验表明,四种病毒的最低核酸检测量分别为:PCV2,29.0 Pg;PPV 17.3 Pg;PRRSV 36.8 Pg;PRV,38.4 pg。通过对33份病猪样品进行检测,结果表明,全部样品均为PCV2阳性,在这些样品中,2份为PPV阳性,4份为PRV阳性,12份为PRRSV阳性。本研究建立的mPCR诊断方法能够对PCV2、PPV、PRV、PRRSV单个或混合病毒感染的样品进行快速鉴别及诊断,同时对以上四种病毒在猪群中的流行病学调查也具有十分重要的意义。更多还原