节点文献
共表达PRRSV修饰的GP5与M蛋白的重组改良型痘苗病毒安卡拉株的构建及免疫效力
【作者】 郑其升； 邓碧华； 曹瑞兵； 王继春； 候继波； 陈溥言；
【机构】 江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心； 南京农业大学动物医学院；
【摘要】 将PRRSV修饰的ORF5(MORF5)与ORF6基因分别克隆入笔者构建的改良型痘苗病毒安卡拉株(Modified vaccinia virus ankara.MVA)转移载体pLR-gpt的两个多克隆位点中,构建重组转移载体pLR-MORF5/ORF6。经脂质体介导,将构建好的重组转移载体转染感染亲本MVA 2h的BHK-21细胞单层,用药物选择性培养基(MXHAT)在24孔板上进行连续筛选纯化,得到带有筛选标记的重组病毒。将rMVAgpt-MGP5/M感染表达Cre重组酶的BHK-21细胞(BHK-Cre),获得删除筛选标记的重组病毒。PCR证明MORF5与ORF6成功插入MVA基因组中;Western-blot与IFA证明重组病毒能表达MGP5与M蛋白;重组病毒的生长特性表明与亲本MVA出现病变的时间及病毒滴度基本一致。用rMVA-MGP5/M免疫6周龄Babl/C小鼠,首免后3周可检测到特异性PRRSV中和抗体,8周后中和抗体效价可达25,并能继续维持4周;细胞因子检测结果表明,重组病毒免疫小鼠产生强烈的Th1型细胞免疫反应。结论:rMVA-MGP5/M具有良好的免疫原性,可作为预防PRRS的候选疫苗进一步研究。
【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征病毒；
改良型痘苗病毒安卡拉株；
修饰的GP5与M蛋白；
共表达；
免疫原性；
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会
- 【会议时间】2008-09
- 【会议地点】中国辽宁大连
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会动物传染病学分会