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猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫荧光诊断方法的建立及其应用
【机构】 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/猪传染病研究室； 东北农业大学动物医学院；
【摘要】 以临床"高热综合征"病例中分离的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)-HBR变异株接种试验猪制备抗血清,采用硫酸铵盐析法提取血清中免疫球蛋白(IgG),异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG,建立了一种直接免疫荧光诊断方法(DIFA),用于病毒感染单层细胞及动物脏器组织切片中抗原检测。本试验对PRRSV感染MARC-145细胞增殖动力学检测结果表明,接种后16h检测到抗原阳性细胞,于60h～72h达到病毒增殖高峰;对病毒人工感染猪脏器组织抗原分布检测结果显示,以腹股沟淋巴结、空肠、睾丸、脾脏、下颌淋巴结、肠系膜淋巴结和扁桃体抗原阳性检测率较高;对临床10个猪场送检的38份病料平均阳性检出率为63.2%(24/38)。该方法具有特异性强、敏感性和重复性好等特点,与RT-PCR法检测结果符合率为96.3%,对几种已知猪病毒抗原无交叉反应,标记的荧光抗体于4℃保存6个月稳定。DIFA为PRRSV的临床诊断提供了一种快速、便捷、敏感和特异的检测方法。
【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征病毒；
直接免疫荧光；
抗原检测；
【基金】 国家“948”计划(2006-Z6);十一五国家支撑计划(2006BAD06A07);院所长基金
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会
- 【会议时间】2008-07
- 【会议地点】中国黑龙江哈尔滨
- 【分类号】S858.28
- 【主办单位】中国农业科学院哈尔滨兽医研究所