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鸡β-防御素-11(Gal-11)cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达
【作者】 蒋瑞瑞； 王彦彬； 康相涛； 孙桂荣； 陈其新； 韩瑞丽； 田亚东； 李国喜；
【机构】 河南农业大学牧医工程学院；
【摘要】 本文运用 RT-PCR 技术,从崇仁麻鸡肾脏总 RNA 中扩增出片断大小为315 bp 的鸡 Gal-11编码 cDNA 序列全长。以 pET32a 为表达质粒构建了重组质粒 pET32a-Gal- 11,并在 BL21(DE3)pLySs 中进行融合表达。诱导剂 IPTG 在0．2～1．2mM 的对重组蛋白的产量无明显影响,加入诱导剂1h 开始可检出量重组蛋白质表达,在2h 时其表达水平已接近最大量。融合表达蛋白经过初步分离、变性、组氨酸亲和层析柱纯化以及复性,对纯化的表达蛋白进行琼脂糖弥散试验检测生物学活性。结果表明纯化蛋白对大肠杆菌、白色念球菌、金黄色葡萄球菌没有产生抗菌活性。崇仁麻鸡 Gal-11在 pET32a 质粒表达体系中成功表达为鸡防御素多肽下一步的研究奠定基础。
【基金】 国家农业科技跨越计划(2005EA750002);国家农业科技成果转化基金(2005410020580);国家科技支撑计划(2006BDA01A09);河南省杰出人才创新基金(074200510009)。
- 【会议录名称】 中国家禽业——机遇与挑战——第十三次全国家禽学术讨论会论文集
- 【会议名称】第十三次全国家禽学术讨论会
- 【会议时间】2007-10
- 【会议地点】中国河南郑州
- 【分类号】S831;Q78
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会家禽学分会