口蹄疫病毒转基因番茄对豚鼠诱导免疫保护

【作者】 潘丽； 张永光； 王永录； 方玉珍； 蒋守田； 王炜； 孙元； 吕建亮； 谢庆阁；

【机构】 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点实验室；

【摘要】 分别构建了O型口蹄疫病毒China99株结构蛋白VP1基因及结构蛋白前体P1-2A、非结构蛋白3C及部分2B 基因(P1-2X3C)的植物表达载体,分别命名为pBin438／VP1及pBin438/P1-2X3C,通过农杆菌介导法转化番茄,对获得的卡那霉素抗性植株进行分子生物学检测,85％的再生植株PCR检测阳性;RT-PCR结果证实VP1、P1-2X3C基因在转基因番茄中能够有效转录;将ELISA和Western blot检测阳性的转基因番茄叶片蛋白提取液经肌肉途径免疫豚鼠,于第3次免疫后 28d用100ID50／0．2mL的同源强毒攻击,结果表明口蹄疫病毒VP1、P1-2X3C转基因番茄的表达产物具有良好的免疫原性, 豚鼠3免后血清效价可达1:64-1:128,攻毒后两组免疫豚鼠保护率分别达4/5和5/5。更多还原