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产气荚膜梭菌多重PCR定型方法的建立

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【作者】 田冬青; 蒋玉文; 陈小云; 杨京岚; 丁家波;

【机构】 中国兽医药品监察所;

【摘要】 针对产气荚膜梭菌α、β、ε、ι毒素设计了四对特异性引物,以经厌氧培养12-16h的产气荚膜梭菌菌落为模板, 对本所保存的产气荚膜梭菌参考菌株进行多重PCR扩增,经过PCR反应条件的优化,A、B、C、D、E各型产气荚膜梭菌均扩出了相应的预期条带,从而建立了对产气荚膜梭菌分型的菌落多重PCR方法。对相关厌氧梭菌如诺维氏梭菌、腐败梭菌、破伤风梭菌的扩增均为阴性,表明该方法特异;对单个菌落稀释1000倍后仍可扩出目的条带,说明该方法敏感性高。对送检的病料分别用动物中和试验和多重PCR试验进行鉴定,结果表明,两种方法的符合率达100%。

【关键词】 产气荚膜梭菌; 多重PCR; 定型; 毒素;
  • 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)
  • 【会议名称】中国畜牧兽医学会2006学术年会
  • 【会议时间】2006-10
  • 【会议地点】中国北京
  • 【分类号】S852.61
  • 【主办单位】中国畜牧兽医学会
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