重组MPT83蛋白检测牛结核病间接ELISA方法的建立

【作者】 鲁俊鹏； 罗满林； 林琳； 邹潍力；

【机构】 华南农业大学兽医学院； 广东省动物防疫监督总所；

【摘要】 用纯化的牛分支杆菌重组MPT83蛋白作为包被抗原,建立了检测牛分支杆菌抗体的间接ELISA 方法．确定了间接ELISA各组分的最适反应条件为:抗原包被浓度为1μg/mL,二抗稀释倍数为1 600倍, 血清稀释倍数为60倍,抗原和血清、血清和二抗都是在37℃下反应30 min,底物在37℃显色15 min,阴阳性临界值定为:D655nm=0．5．通过阻断试验、交叉试验．重复性试验表明谊方法特异性强、重复性好．最后用建立的间接ELISA方法对145份结核菌素试验阳性牛的血清和36份结核菌素试验阴性牛的血清进行了检测,结果表明阳性血清的符合率为17．9％,阴性血清的符合率为91．7％．更多还原