PCV2-Cap蛋白重组腺病毒灭活疫苗的制备与免疫效力研究

【作者】 董信田； 王先炜； 李玉峰； 冯志新； 姜平；

【机构】 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室；

【摘要】 将PCV2-Cap蛋白重组腺病毒(rAd-Cap)用0．2％的甲醛37℃作用一定时间后接种293细胞,盲传3代,检测灭活效果．将灭活的rAd-Cap加入适量的白油和氢氧化铝胶制成Cap蛋白重组腺病毒油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,3周后加强免疫一次,分别于一免后21天和35天进行ELISA抗体检测．为了评价国产油佐剂和进口油佐剂的免疫效果,我们还进行了猪体免疫效力试验．通过ELISA抗体、攻毒后临床表现及体温变化、剖解时的病理变化、平均日增重及病毒血症等指标对疫苗效果进行评价．结果为: ①rAd-Cap能被甲醛完全灭活,灭活时间为14 h．②rAd-Cap油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗免疫小鼠后均能诱导机体产生体液免疫应答,并且油佐剂灭活疫苗免疫效果好于铝胶佐剂灭活疫苗．③猪体免疫效力试验表明,rAd-Cap油苗能够诱导机体产生较高水平的ELISA抗体。攻毒后,攻毒对照猪平均体温高于免疫猪, 空白对照猪体温始终保持正常．并且攻毒后免疫猪及空白对照猪平均体重均升高,而攻毒对照猪平均体重有所降低,但两免疫组和空白对照组之间平均日增重差异不显著(P>0．05)。病毒血症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明rAd-Cap油苗能够能有效降低猪体的带毒．以上结果表明,rAd-Cap灭活疫苗免疫小鼠和猪体后均能诱导机体产生免疫应答,并能对猪体产生一定的免疫保护作用．更多还原