柔嫩艾美耳球虫的低温保存

【作者】 丁隽； 韦铮； 遇奇； 刘群；

【机构】 中国农业大学动物医学院；

【摘要】 在对球虫的研究、疫苗生产和球虫病的诊断中离不开球虫的保存和保种,目前常规的保存方法是将球虫的孢子化卵囊保存在2．5％重铬酸钾中,置于4℃,一般保存期不超过一年。一年内必须进行鸡体传代, 以保持球虫活力,这不仅给工作人员造成麻烦,而且浪费大量的人力和物力,并且增加了虫种被污染的机会。本研究配制了4种不同组分的冻存液,将柔嫩艾美耳球虫的未孢子化卵囊、孢子化卵囊、孢子囊和子孢子分别与不同组分的冻存液混合后在液氮中的保存。在冻存34天时检测冻存球虫的活力,方法是:1．分别将各保存液中的未孢子化卵囊解冻,观察其继续孢子发育来的情况;2．将各保存液中的孢子化卵囊、孢子囊和子孢子解冻后经口接种鸡,检验粪便中卵囊．以监测其在鸡体内发育与繁殖情况,用以检验各保存液中球虫经液氮冻存球虫活力的变化。结果显示:在各种冻存液中保存的未孢子化卵囊均不能继续孢子发育;在各冻存液中保存的孢子化卵囊也不能在鸡体内繁殖,只有以含有高糖DMEM、DMSO以及小牛血清组成的冻存液中保存的孢子囊和子孢子成功感染鸡,在感染鸡的粪便中检出柔嫩艾美耳球虫卵囊;其他各种冻存液中保存的孢子囊和子孢子未能成功感染鸡。经对产生卵囊的鸡粪便进行克粪便卵囊计效发现．冻存球虫感染鸡的卵囊产量显著低于4℃保存球虫感染鸡的卵囊产量,说明球虫在液氮中保存后的活力明显低于常规方法保存球虫。需要进一步研究,筛选更合适的保存方法和条件。更多还原