传染性法氏囊病毒结构蛋白基因VP3的克隆与原核表达

【作者】 彭志伟； 王笑梅； 高宏雷； 付朝阳； 张厚双； 包晓玮； 冉多良；

【机构】 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所； 新疆农业大学；

【摘要】 利用PCR(Polymerase Chain Reaction)技术扩增出IBDV的结构蛋白基因VP3,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位置、大小和读码框均正确。SDS-PAGE检测表明,经重组质粒VP3/PA转化、诱导的受体菌E.coli DH5 α能表达结构蛋白基因VP3,约33 ku,表达量达到了菌体总蛋白的33.9%,经Western blot等检测表明,诱导表达的抗原蛋白能与vvIBDV阳性血清发生特异性反应。这为IBDV血清学诊断方法的建立打下了基础。更多还原