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禽流感病毒M1蛋白的表达及其免疫反应性分析
【机构】 云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室;
【摘要】 根据已知禽流感病毒M1基因序列设计合成PCR克隆引物。自接种H5N1亚型病毒的鸡胚组织中提取RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶(PyobestTM DNA Polymerase)经PCR扩增M1基因,采用Invitrogen定向表达系统(ChampionTM pET directional TOPO expression system)进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组蛋白,分子量约29.8 ku。采用单克隆抗体和阳性血清经ELISA、阻断ELISA、免疫印迹分析重组蛋白的免疫反应性。结果发现:M1重组蛋白能与单克隆抗体和阳性血清发生特异性结合,且此结合能被天然病毒抗原阻断。研究表明:M1重组蛋白具有良好免疫反应性。
【基金】 云南省科技攻关项目(2004NG-01);农业部948项目(2004-Z41)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会
- 【会议时间】2005-05
- 【会议地点】中国济南
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会