一种分离猪Ⅱ型圆环病毒的新方法

【作者】 蒋智勇； 宋长绪； 黄忠； 刘燕玲； 张春红； 王浩文； 蔡汝健；

【机构】 广东省农科院兽医研究所；

【摘要】 设计合成一对扩增猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)全基因组的特异性引物,从2份患断奶后仔猪多系统衰弱综合征(PMWS)的死亡仔猪病料中,PCR扩增和克隆了2株PCV2全基因组。将所测序列与已公布的PCV毒株序列进行同源性比较。结果显示,所测的两个毒株间核苷酸同源性为99.3%,与其他毒株的同源性也较高,达95%以上;ORF1的核苷酸同源性高达96%以上,氨基酸同源性大于98%;ORF2的核苷酸同源性较低,为90%-99%不等,推导的氨基酸序列同源性介于86%-99.2%。将克隆到的PCV2基因组环化后,脂质体介导转染PK15细胞,盲传5-10代。PCR和Western blot结果表明,克隆到的基因组具有感染性。更多还原