日本血吸虫(中国大陆株)新基因SjPP的研究

【作者】 姚利晓； 林矫矫； 傅志强； 朱传刚； 李浩； 蔡幼民；

【机构】 中国农科院上海家畜寄生虫病研究所上海动物生物技术研究中心农业部动物寄生虫学重点开放实验室；

【摘要】 血吸虫病是一种危害严重的人兽共患病。早期的研究发现东方田鼠是我国血吸虫病流行区唯一一种感染日本血吸虫后不致病的哺乳动物,且这种抗性是先天的,可遗传的.利用东方田鼠感染血清免疫筛选日本血吸虫(中国大陆株)成虫cDNA 表达文库,获得5个EST 片段:mfs-1、mfs-2、mfs-3、mfs-4和mfs-5(登录号分别为BE974942、BE974943、BE974944、BE974945,BE974946).利用5′RACE 技术和电子克隆技术,获得mfs—5的全长基因序列,编码302个氨基酸,理论分子量为34.7kDa,等电点为5.51。序列分析显示该基因为尚未报道的日本血吸虫新基因,其编码序列具有丝/苏氨酸蛋白磷酸酶的保守序列LRGNHE,并且含有该酶特异性抑制剂冈田酸的作用位点SAPNYC,与人的PP6、鼠PP6、果蝇PPV 等蛋白的氨基酸序列具有高度同源性,分别达72%、70%和70%,故将该基因命名为SjPP。构建该基因的重组表达载体pET28a(+)/SjPP和核酸疫苗pCMV—Script/SjPP,在BALE/c小鼠免疫保护实验中,重组蛋白pET28a(+)/sjPP 诱导的减虫率、粪便减卵率分别是18.18%、32.23%,DNA 疫苗诱导的相应值为26.77%、31.91%,两者都诱导了部分免疫保护作用.更多还原