堆型艾美耳球虫cSZ1基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究

【作者】 覃宗华； 谢明权； 蔡建平； 艾哈迈德； 叶秀华；

【机构】 广东省农科院兽医研究所； Nyala大学兽医学院；

【摘要】 用PCR 方法扩增堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)广东株(GD)子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架(ORF),与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E.coli x6212,荻得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Sa lmonella typhimurium)x4550.经IPTG诱导获得了cSZ1基因在减毒S.typhimurium 的高效表达,表达产物占菌体总蛋白的9.2%,重组蛋白分子量约为19 kDa。将重组减毒S.typhimurium 分别以10~8或10~9CFU/鸡经口免疫4日龄岭南黄肉鸡,免疫后两周血清中可检测到抗cSZ1的特异性IgG,三周时抗体水平达到峰值;25日龄时可在肠道检测到特异性IgA 的分泌。免疫后三周,试验鸡分别经口攻击感染500个E.acervulina孢子化卵囊,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线;计数攻虫感染后第3.5-9.5天卵囊总产量,两个免疫组分别能降低25.1%和46.4%的卵囊产生。更多还原