毒害艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因的克隆及序列分析

【作者】 蔡建平； 谢明权； 覃宗华； 艾哈迈德； 彭新宇； 魏文康； 吴惠贤；

【机构】 Nyala大学兽医学院； 广东省农科院兽医研究所在；

【摘要】 根据已报道的柔嫩艾美耳球虫(豪顿株)微线蛋白-2(EtMIC-2(Ht))的cDNA 序列设计特异性引物,以孢子化12h 的E.nectrix(广东株)卵囊总RNA 为模板,用RT-PCR 方法首次成功克隆了E.nectrix 广东株微线蛋白-2(EnMIC-2(Gd))的cDNA。EnMIC-2(Gd)的cDNA 全长1126bp,其中第44-1069位是该基因的阅读框架(ORF),共编码342个氨基酸,两端为非编码区。比较EnMIC-2(Gd)与EtMIC-2(Ht)的核苷酸序列,二者同源性为99.7%(1123/1126),三个变异全部位于阅读框架之内,即第71、207和1017位EtMIC-2-Ht 为C、A 和T,而EnMIC-2(Gd)在相应位置分别为T、T 和C。比较根据核苷酸序列推导的氨基酸序列,上述的三个核苷酸变异有两个导致了所编码氨基酸的改变,其中第71位的变异为无义突变,第207位的变异导致所编码氨基酸由天门冬酰胺(D)变为缬氨酸(V),而第1017位的变异则导致甘氨酸(G)变换为缬氨酸(V)。EnMIC-2(Gd)与EtMIC-2(Ht)所编码氨基酸序列同源性为99.42%(340/342)。这提示微线蛋白在种间具保守性,有可能作为抗原同时诱导针对多种球虫的免疫保护。更多还原