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猪口蹄疫病毒VP1基因和免疫串联片段F的克隆及其在Vero细胞中的表达
【机构】 华南农业大学兽医学院；
【摘要】 将猪口蹄疫病毒的VP1基因通过RT-PCR方法从细胞病毒液中扩增后克隆进pGEM-T Easy载体,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确,再亚克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)上,得到重组质粒pcDNA-VP1。同时根据获得的猪口蹄疫病毒VP1基因的序列,结合相关的文献资料,设计合成免疫串联片段F,F含有VP1基因的主要抗原位点141-160及200-213位的氨基酸序列,将F片段克隆到真核表达载体pcDNA-3.1(+)中,得到重组质粒pcDNA-F。重组质粒pcDNA-VP1和pcDNA-F在脂质体介导下转染Vero细胞,通过间接免疫荧光分析,表明VP1基因和F基因均在Vero细胞中成功进行了瞬时表达。为进一步研制FMD基因疫苗奠定了基础。
- 【会议录名称】 人畜共患传染病防治研究新成果汇编
- 【会议名称】家畜传染病学会第六次人畜共患病学术交流会
- 【会议时间】2004-09
- 【会议地点】中国安徽合肥
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会家畜传染病分会、解放军军需大学