荧光RT-PCR检测活禽和禽组织中禽流感病毒的研究

【作者】 张鹤晓； 赖平安； 刘环； 刘继红； 郭晋优； 谷强； 张利峰； 汪琳； 段生涛； 张向东； 朱文斯； 杨伟； 李宁；

【机构】 北京出入境检验检疫局； 深圳匹基公司； 中国农业大学；

【摘要】 本研究根据A型流感病毒的核酸保守区共有序列,开发、设计多条引物和探针序列,从中筛选敏感、特异的引物、探针,在循环参数、病毒核酸提取方法及逆转录条件优化的基础上,建立了快速的通用型“一步法”检测活禽或禽产品中所有A型禽流感病毒的荧光RT-PCR检测技术。该方法与国际标准方法——世界动物卫生组织OIE确定的鸡胚病毒分离相比,敏感性基本一致,可直接用来检测咽喉/泄殖腔拭子和禽肉中的禽流感病毒,将检测时间从原来最短所需要的几周缩短为4小时。最后,通过运用建立的该方法对国家质检总局组织的盲样测试和在哈兽研进行的临床验证试验,以及对2120份临床样品的检测,检验证明了该试剂盒优良的检测效果和稳定性。更多还原