鸡新城疫病毒感染性核酸免疫抗原、抗体和N基因的检测

【作者】 江国托； 崔丽； 李凤华； 康丽娟；

【机构】 大连三仪生物工程研究所； 大连市兽医卫生防疫站；

【摘要】 SDS-蛋白酶K法提取鸡新城疫病毒(NDV),lasota株鸡胚尿囊液毒纯化病毒的全基因组RNA,DEAE纤维素长距离柱层析纯化后,适量肌肉注射100日龄DNV非免疫鸡,24小时后口服过量的特异活性蛋白酶,于不同试验时间分别采取试验鸡血清和不同组织脏器,采用Dot-ELISA、Wlestern blot和Southern blot方法分别检测试验鸡NDV抗体、DNA抗原和NDVN基因。结果表明,NDV感染性核酸注射后24小时,口服活性蛋白酶,48小时后出现NDV特异性抗体,96小时抗体达最高峰,Dot-ELISA血清抗体效价可达1:1024;无活性蛋白酶情况下,感染性核酸注射后120小时开始出现DNA特异性抗体,Dot-ELISA血清效价仅为1:16;Western blot和Southern blot分别可自多个组织脏器中检测到NDV抗原及N基因。更多还原