恒河猴肝脏的病理组织观察与图象分析

【作者】 于博； 孔小明； 程树军； 黄韧；

【机构】 华南农业大学兽医学院； 广东省实验动物监测所；

【摘要】 材料与方法:30只恒河猴采自国内云南、广东西省三家灵长类研究中心,经检疫排除沙门菌、志贺菌、结核菌、B病毒等传染性疾病,年龄2～20岁,雌15,雄15。盐酸氯胺酮麻醉后,单侧颈动脉插管放血处死。取肝组织,分别以10%中性甲醛、5%中性甲醛。Helly液和Carony液固定。全部组织按常规方法制备5微米石蜡切片或做冰冻切片。常规H.E染色,并用GordonSweets改良法染网状纤维,VanGieson法染胶原纤维,氯化金法显示贮脂细胞。将组织切片置于Olympus光学显微镜下,应用Leica图象采集系统将光学信号转化为电信号输入电脑,即将光学图象转化为数码图象。应用Leica Qwin显微图象处理系统对显微组织的形态特征进行测量与分析。主要测量的参数有细胞截面积、细胞直径、细胞圆度、细胞平均体积、核浆面积比、核浆体积比、细胞周长、核面积、核周长、核平均体积、核直径、核圆度等10项参数。面积及长度参数由系统自动生成,体积参数有相应的体视学公式计算。结果:肝细胞因物质代谢障碍而发生的常见病变显微病变有:颗粒变性(13/30)。水泡变性(12/30)、脂肪变性(6/30)及肝细胞坏死(5/30),在图象分析中肝细胞颗粒变性、水泡变性和脂肪变性都表现为细胞直径、面积和体积增大,核质比减小与组织观察中的细胞肿胀相吻合,细胞核的形态参数无明显变化。肝细胞坏死中坏死细胞聚集成小灶状或呈弥漫性大面积坏死,其细胞及细胞核的正常形态都受到破坏,形态参数的离散度较大。肝脏的主要炎症主要表现为:淋巴细胞弥漫性浸润(6/30)、淋巴细胞局灶性浸润(8/30)、中性粒细胞浸润(9/30)、嗜酸性细胞浸润(3/30),肝脏的炎症病变中由于浸润的炎症细胞和细胞核的直径、面积和体积都小于肝细胞相应的形态参数,核质比则增大。肝脏增生性病变有:纤维组织增生(13/30),胆管增生(3/30),卵圆细胞化生(8/30),图象分析中则表现为多个形态参数的变化,与正常肝细胞之间也有较大差异。结论:实验用恒河猴肝脏的自发性病变常见多发,且有年龄上的差异,通常随着年龄的增长,病变的种类增多,程度加深。在医学领域,肝脏病变的计算机辅助诊断和诊断的自动化成为肝病研究的重要探索方向。本研究结果显示肝脏的实质变性、坏死、炎症反应和增生性病变可造成多个形态参数的显著变化,图象分析的方法应用于肝脏常见病变的的诊断具有可行性。更多还原