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鸡白细胞介素15基因在昆虫细胞中的高效表达
【机构】 甘肃农业大学动物医学院； 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室；
【摘要】 本实验用HindⅢ/Pst从重组质粒pPRoChIL-15上切下外源片段mChIL-15基因,定向亚克隆到经同样酶切处理的杆状病毒转移载体pMelBacB中,经酶切、PCR和序列测定鉴定后,与杆状病毒线形化DNA(Bac-N-BlueTMDNA)共转染Sf9昆虫细胞,经三轮蚀斑纯化,成功构建了重组杆状病毒rBac-ChIL-15,用该重组病毒感染处于对数生长期的Sf9细胞,在不同的感染时间收取样品,然后进行SDS-PAGE和Western blot分析。结果显示,重组病毒感染Sf9细胞后24小时已表达rChIL-15,96小时表达量达到高峰,重组蛋白分子量约为22kDa,占细胞总蛋白的25%左右。
【关键词】 鸡白细胞介素15基因；
重组杆状病毒；
表达；
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会兽医病理学分第12次暨中国动物病理生理学专业委员会第11次学术讨论会
- 【会议时间】2003-10
- 【会议地点】中国广州佛山
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会