【作者】 陈勇； 李德发； 陆文清； 杨文军； 惠柏棣； 韩雅珊；

【机构】 中国农业大学农业部饲料工业中心； 中国农业大学食品学院；

【摘要】 建立了一种简单、快速分离测定而生红球藻中类胡萝卜素及叶绿素的反相高效液相色谱法。离心法收集雨生红球藻细胞,用甲醇:二氯甲烷（75:25,V/V）提取色素,提取液经0.45μm过滤后直接上机分析。色谱条件:分析柱为Nova-Pah C₁₈（300×3.9 mm I.D.）;检测器为Waters996光电二极管阵列检测器,光谱扫描波长范围为250 nm～700 nm,积分定量用检测波长为444 nm和476 nm:进样量为30 μL。流动相A、B、C分别为水、甲醇和丙酮,流速为1.0 mL/min,其梯度洗脱程序为:0 min 9%A,76%B,15%C;9 min 5%A,45%B,50%C;15 min 4%A,38%B,58%C;18 min 3%A,27%B,70%C;25 min 3%A,27%B,70%C;27 min 100%C;28 min 100%C。在该条件下,游离虾青素、多种虾青素酯、多种其它类胡萝卜素及叶绿素全部洗脱并达到基线分离,游离虾青素、斑蝥黄质、叶绿素a、叶绿素b、β-胡萝卜素的保留时间分别为5.62,10.03,12.80,15.43和21.85 min,多种虾青素酯在13～20 min之间洗脱出。实验结果表明,该方法中游离虾青素浓度在0.32 mg/L～31.67 mg/L时线性关系良好,r=0.9658,低、中、高浓度下的回收率（96.23%～102.34%）、日间和日内精密度（RSD为2.04%～4.86%）均符合方法学要求,能快速、准确地定量测定雨生红球藻中多种类胡萝卜素和叶绿素的含量。更多还原