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牛体外受精胚胎冷冻保存与解冻孵化实验研究报告
【机构】 吉林省农业科学院畜牧分院; 镇南种羊场;
【摘要】 用添加5%FCS的HEPES缓冲TCM199,共培养法获得牛体外受精胚胎,选取A级囊胚期和扩张囊胚期胚胎进行冷冻保存。冷冻保护液组成为;18%FCS、72%PBS、10%(1.4mol)甘油、0.685g/ml蔗糖。使用日本产FHK ET—1型胚胎冷冻机,冷冻液为乙醇(ethanol)。冷冻程序为:①室温状态下将胚胎放入冷冻保护液平衡30min(在此期间将胚胎装入细管),然后从-7℃开始恒温冷冻10min,并在第2min内植冰;②再以0.5℃/min的速度缓慢冷冻32min至-23℃;③再以-23℃恒温冷冻10min结束后投入液氮。对冷冻保存6h~5d的胚胎进行解冻与孵化。解冻后胚胎存活率平均为90.0%;用20%FCS+80%HamF10孵化培养24h和48h存活率分别为77.8%和51.9%。实验结果表明,该冷冻方法获得较高的解冻存活率和孵化率。
【基金】 吉林省外专局引进国外先进技术项目(982200065)
- 【会议录名称】 第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集
- 【会议名称】第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会
- 【会议时间】2001-06
- 【会议地点】中国江苏扬州
- 【分类号】S823
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会、中国农业科学院畜牧研究所、中国农业大学动物医学院、中国农业科学院兰州兽医研究所、中国牧工商(集团)公司、中国农业大学动物科技学院、江苏省家禽科学研究所、兽医生物技术国家重点实验室(哈尔滨)