鸡含锰超氧化物歧化酶cDNA克隆及序列分析

【作者】 卜友泉； 罗绪刚； 李素芬； 鲁成； 李英文； 邝霞； 刘彬； 李建凡； 余顺祥；

【机构】 中国农业科学院畜牧研究所；

【摘要】 为了弄清鸡含锰超氧化物歧化酶(manganese—containing superoxide dismutase,MnSOD)的cDNA序列以开展动物锰营养学的深入研究,本研究根据已知鸡MnSOD的N端氨基酸序列设计简并引物,应用3’RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术,扩增克隆了鸡心肌MnSOD 990bp的3’cDNA片段。再根据3’RACE片段测序结果设计引物进行5’RACE,结果获取了一与3’RACE片段相互重叠的鸡心肌MnSOD 521 bp的5’RACE片段,并对其进行了克隆测序。最后根据3’RACE片段和5’RACE片段序列信息进行拼接,从而获取鸡MnSOD cDNA的全序列信息。研究结果表明:鸡MnSOD cDNA全长为1108个核苷酸,其中5’非翻译区25个核苷酸,编码区675个核苷酸,3’非翻译区408个核苷酸,编码一个长224个氨基酸残基的蛋白质。其中信号肽长26个氨基酸残基,成熟酶蛋白长198个氨基酸残基,分子量为22kD。与人、大鼠、线虫、果蝇等真核生物MnSOD氨基酸序列的同源性分别为82.4％、84.7％、62.4％、59.3％。更多还原