用发光法进行Ames试验

【作者】 朱文杰； 杨笃才； 景奉香； 杨烨烨； 赵曙霞；

【机构】 华东师范大学；

【摘要】 <正> Ames试验有着广泛的应用前景,但操作繁复,尤其是平皿计数给操作带来极大不便,也易致误差.据文献报道己有不少方法对Ames试验加以改进.我们采用基因克隆对Ames试验的菌株加以改造,最终用生物发光检测法取代原Ames试验的平皿计数.简介如下.首先,将淡水发光菌青海弧菌Q-67的发光基因(lux genes)克隆成功,构建了带有青海弧菌luxgenes的质粒pDC67.该质粒可在宿主细胞HB101中表达荧光酶,加入该酶的底物长链脂肪醛(我们采用葵醛)即可发光,肉眼于暗室中可见绿色荧光.为了将lux genes导入Ames试验的菌株中,需克服质粒的不相容性,我们构建了新的质粒.将pDC67上的lux genes片断(约5kb)克隆于质粒pACYC184中,构建或含有lux genes的新的pACYC系质粒,定名为pACYCL184.更多还原