辣椒ISSR-PCR体系的优化及不同引物扩增模式分析

【作者】 杨若林； 张璐； 刘文轩；

【机构】 上海大学生命科学学院；

【摘要】 <正> 简单重复序列扩增多态性（ISSR）是由Zietkiewicz E.等于1994创建的分子标记技术。目前,有关辣椒ISSR及其在育种和种质资源研究中的应用鲜有报道。因此,我们从多方面对辣椒ISSR-PCR技术体系进行了优化;并利用优化后的体系,以不同串联重复的ISSR引物对10个品种的DNA混合样品进行了扩增,初步研究了不同ISSR引物的扩增模式及其多态性,旨为辣椒种质资源的分类、鉴定、遗传图谱的构建以及分子标记辅助育种奠定基础。一、ISSR-RCR反应体系及参数的优化1、反应体系的优化对扩增体系的模板浓度（10-100ng）、引物浓度（0.1-1.5μM）以及Mg²⁺浓度（0.5-10,0mM）进行了优化。结果显示:在20μl的PCR反应体系中,模板浓度为20ng,引物浓度为0.6μM,Mg²⁺浓度为更多还原