Ghrelin促进PC12细胞增殖的机制研究

【作者】 苗艳颖； 侯忠赤； 翁良； 祝世功；

【机构】 北京大学医学部生理及病理生理学系；

【摘要】 <正>目的:ghrelin作为一种脑肠肽,是生长激素促分泌剂受休(GHSR)的内源性配体,在能量平衡、摄食调节等方面具有重要生物学功能。近来发现其具有促进细胞增殖的作用。但其促进细胞增殖的机制尚未阐明。本研究目的是以PC12细胞为研究对象,研究了ghrelin促进细胞增殖的机制。方法:免疫荧光染色法观察Ghrelin、GHSR-1a表达,MTT法测定细胞存活力,[3H-TdR]掺入法测定细胞增殖率,采用相差显微镜观察形态,Western Blot检测GHSR-1a、ghrelin蛋白表达。结果: 光镜下观察细胞形态,PC12细胞成簇生长,有一定的折光性,细胞大小均一,贴壁牢固。给予ghrelin 的细胞,细胞簇的数量增加,细胞密度较对照组增多,折光性强。Ghrelin可以剂量依赖方式增加细胞存活力和[3H-TdR]掺入量。给予PKC抑制剂细胞簇数量明显减少,细胞发生分化,细胞大小不均。细胞存活力和[3H-TdR]掺入量减少,说明阻断PKC通路对ghrelin的细胞促增殖作用具有明显的抑制作用。同样,预先给予PI-3k抑制剂也可明显抑制ghrelin的促细胞增殖作用。检查GHSR-1R 研究结果表明,在PC12细胞上有GHSR-1a的表达。Ghrelin作为GHSR-1a的内源性配体可增强GHSR-1a的表达,ghrelin的这种作用也可被PI-3k的抑制剂所阻断,但PKC阻断剂则不影响ghrelin 此种作用。结论:发现PC12细胞上也有GHSR-1a的表达,Ghrelin可以增强GHSR-1a表达。Ghrelin 通过其受体促进PC12细胞增殖,PKC和PI-3k信号途径参与了ghrelin促细胞增殖的机制。更多还原