TGFβ1、BMP2、DMNCP诱导颅神经嵴干细胞向成牙本质样细胞分化

【作者】 田卫东； 江宏兵； 刘磊； 汤炜； 郑晓辉； 陈希哲；

【机构】 四川大学华西口腔医学院；

【摘要】 目的:本研究在成功分离培养颅神经嵴干细胞(CNCSC)的基础上,研究TGFβl、BMP2、牙本质非胶原蛋白(DMNCP)诱导CNCSC向成牙本质样细胞分化。方法:无血清条件培养颅神经管组织块获取CNCSC,分别以TGFβ1+BMP2+DMNCP、TGFβ1+:BMP2、DMNCP、空白组为诱导因子,诱导CNCSC分化。诱导14天后,分别以免疫细胞化学、钙结节染色、碱性磷酸酶活性检测等方法确定CNCSC的成牙本质样细胞表型分化。结果:诱导后细胞发生形态变化,表现为细胞细长,长突起形成,呈终末分化细胞形态特征;各诱导组均表现为Ⅰ型胶原蛋白阳性表达,而对照组不表达Ⅰ型胶原;TGFβ1+BMP2+DMNCP及DMNCP诱导组分别表现为牙本质涎磷蛋白(DSPP)阳性表达,而TGFβ1+BMP2及空白对照组为DSPP阴性表达;同时,TGFβ1+BMP2+DMNCP及DMNCP诱导组的碱性磷酸酶活性明显较TGFβ1+BMP2及空白对照组的高(P<0.01)。结论:DMNCP可诱导CNCSC的成牙本质细胞表型分化,外源性TGFβ1、BMP2具有正协同作用。初步建立体外牙再生诱导实验模型,为进一步开展牙再生的实验研究开辟新途径。更多还原