应用DHPLC检测31例家族性腺瘤性息肉病家系APC基因突变的研究

【作者】 蔡善荣； 张苏展； 郑树；

【机构】 浙江大学医学院附属二院肿瘤研究所；

【摘要】 目的:应用DHPLC检测我国家族性腺瘤性息肉病(FAP)的APC基因变异特征, 研究其病因机制。方法:31个家系采集家系先证者,患者和家系成员的外周血淋巴细胞, 抽提DNA并以降落式PCR扩增APC基因各外显子和启动子。基因突变检测先由DHPLC 进行筛选,发现异常峰者进行测序鉴定,并与网络数据进行比对。结果:FAP家系APC基因的突变检出率为48.39％,SNP的检出率为45.16％。研究发现了4个新的突变和1个新的 SNP位点及3例不同的内含子突变。4个新的突变分别位于255,677,1192,1403密码子, 均为移码突变。证明了DHPLC能检出APC基因的突变,尤其对SNP检出效果更好。研究表明,在APC基因的突变中,移码突变占86.67％,无义突变占13.33％,说明移码突变是国人APC基因突变的主要方式。在突变位点上,15号外显子突变最常见,约占86.67％。结论:发现了4种新的导致蛋白编码改变的突变,3例内含子的突变和1个新的SNP位点。发现国人FAP家系APC基因中SNP的检出率较高。证实移码突变是国人APC基因突变的主要方式。更多还原