大肠癌淋巴结微转移的病理生物学研究

【作者】 丁彦青； 孙青；

【机构】 第一军医大学病理学教研室；

【摘要】 目的:建立大肠癌淋巴结微转移检测的病理生物学方法, 探讨其应用价值及临床意义。方法:采用优化的免疫组化、流式细胞术、强化 RT-PCR 和改进的 MASA 法等技术,对手术切除62例大肠癌及其所属329个淋巴结进行系统检测。结果:1.免疫组化检测,大肠癌所属各站常规病理检查转移阴性的162个淋巴结中5例 (20.64%)的31个(19.14%)淋巴结呈 CK(AE1/AE3)阳性;4例(16%) 的23个(14.34%)淋巴结呈 CEA 阳性;两者并联总阳性计6例(24%) 34个(20.99%)淋巴结。微转移的检出与原发癌的大小、浸润深度和分化程度有一定的相关性。2.建立的流式细胞术检测大肠癌淋巴结微转移的参照模型检出值与理论值呈较理想的一致性,敏感度达10 /105。在7例(28%)患者的38个(23.45%)淋巴结中检见癌细胞,且阳性检出病例原发癌的大小、浸润深度及分化程度与阴性者比较有差别。3.强化 RT-PCR 法检测了10例大肠癌及其所属的93个淋巴结,其中4例(40%)患者的所属27个(29.03%)淋巴结呈现阳性扩增,非癌淋巴结阴性。4.改进了 MASA 法,并用 K-ras 12密码子特异引物对多基因 PCR-SSCP 法筛检出的27例 K-ras12/13密码子阳性病例进行检测。有8例(8/60例,13.33%)癌组织呈阳性,其相应74个常规病理转移阴性的淋巴结中的18个(24.64%)检出与癌组织相同的阳性扩增带。通过测序证实了此方法学的可靠性。结论: 四种方法均提高了微转移的检出率,以强化 RT-PCR 和流式细胞术较为敏感;免疫组化法简便,但检出率偏低;MASA 法快速特异,但需寻找癌更为普遍和稳定的突变热点。多种方法联合应用是提高大肠癌淋巴结微转移检出率最有效的措施。更多还原