mRNA差异显示技术查找肝癌相关基因

【作者】 刘殿武； 王立忠； 郭丽莉；

【机构】 河北医科大学流行病学教研室；

【摘要】 为了查找肿瘤组织中与肿瘤发生发展相关的基因,将手术切除的原发性肝癌组织和正常肝组织,用异硫氢酸胍一步法提取总 RNA 后,用 DNA 酶去除总 RNA 中污染的 DNA,使用 T_12A、T₁₂MC 和T₁₂ MG 三种锚定引物反转录合成 cDNA,然后再用2种随机引物与上述3 种锚定引物的含同位素的反应液中进行 PCR 反应。将 PCR 产物用变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离,经放射自显影后,从凝胶上选出肝癌组织中与正常肝组织不同的差异带。结果:从凝胶中共选出9 条差异带。将回收的9条带再经 PCR 扩增和 Southern 杂交鉴定,从中选出3种不同的基因片断。测序后与 GenBank 中的基因进行同源性分析,未发现同源序列。因此将其命名为肝癌相关基因1-3。3个基因的全长及在肝癌发生发展中的作用有待进一步研究确定。更多还原