癌胚抗原单抗的制备及免疫学性状和动物体内分布的研究

【作者】 李振甫； 杨志； 张宏； 林保和；

【机构】 北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院北京市肿瘤防治研究所；

【摘要】 目的:制备针对 CEA 特异抗原决定族的单克隆抗体,为肿瘤免疫诊断及肿瘤放射免疫显像和放射免疫治疗提供特异抗体。方法:本研究从人结肠癌肝转移灶提取 CEA 抗原,利用杂交瘤技术制备抗 CEA 单克隆抗体,ELISA 方法测定单抗对免疫原 CEA 的结合活性。单抗腹水经蛋白 A 及羟基磷灰石柱层析纯化。癌手术标本切片及正常组织切片对单抗进行免疫组化评价。核素^99mTc/¹⁸⁸Re 标记单抗,测定不同时间各脏器的ID%/g,并进行动物体内分布测定及苛瘤裸鼠的显像。结果:纯化的 CEA 抗原经鉴定分子量为180kd 的糖蛋白,抗 CEA 单抗的亲和常数 K 值在7.4×10⁹/M。该单抗在80-90%的结肠癌,胃癌和肺癌组织中可见阳性着染,而正常组织无着染。裸鼠注射^99mTc 标记单抗后24小时肿瘤 ID%/g 高达15%,瘤/血、瘤/肾和瘤 /肝比值分别为1.82,1.51和2.92,其余脏器的 T/NT 比值均大于 3.0。¹⁸⁸Re 标记的单抗,肿瘤在24小时达到摄取高峰,T/NT 比值从24 小时到96小时逐渐增高,瘤/血比值从24小时1.55上升到96小时的3.90,而其余脏器的 T/NT 比值各时象除24小时瘤/肾为2.73外, 均大余4.0。标记物在肿瘤中有很高浓聚,苛瘤裸鼠显像清晰。结论:纯化的 CEA 抗原有良好的免疫原性,制备的 CEA 单抗特异性较高,有助于肿瘤免疫诊断的研究。核素^99mTc/¹⁸⁸Re 标记的单抗在动物体内外稳定性良好,体内分布结果理想,可用于放射免疫显像定位和导向治疗的临床应用研究。更多还原