S100A2基因cDNA的克隆及其在肝癌细胞中的表达

【作者】 王秀清； 曾益新；

【机构】 深圳市人民医院深圳市肿瘤研究所； 中山医科大学肿瘤中心；

【摘要】 目的:克隆 S100A2 cDNA、构建 S100A2重组表达载体并在肝癌细胞 QGY7701中进行表达。方法:应用 RT-PCR 和 DNA 重组技术构建绿色荧光蛋白(EGFP)-S100A2融合蛋白表达载体,经脂质体导入 QGY7701细胞中进行表达。应用荧光显微镜直接观察 EGFP- S100A2融合蛋白的表达情况,C418筛选阳性细胞克隆。结果:构建了带有 EGFP 的 S100A2重组表达载体 EGFP-C2-A2,并在肝癌细胞包 QGY701中获得了表达。荧光显微镜下可见 EGFP-S100A2融合蛋白定位于细胞及胞核,而 pEGFP 载体对照之 EGFP 只定位在胞浆中。结论:EGFP-S100A2融合蛋白能够在肝癌细胞 QGY7701中获得表达,各自在细胞中的定位互不受影响,推断此融合蛋白具有各自的生物学活性。更多还原