黑果黄皮Clausena dunniana Levl抗癌活性成分的研究 Ⅰ．咔唑生物碱类新细胞周期抑制剂及细胞调亡诱导剂

【作者】 崔承彬； 闫少羽； 蔡兵； 赵庆春； 姚新生； 曲戈霞；

【机构】 北京生物医药研究所； 沈阳药科大学天然药化教研室；

【摘要】 目的:黑果黄皮 Clausena dunniana Levl 系芸香科（Rutaceae）黄皮属植物,我国局部地区民间将其用于治疗癌症。有关黄皮属植物化学成分的研究报道很多,其主要化学成分为咔唑类生物碱和香豆素类化合物,但黑果黄皮化学成分的研究、特别是有关该植物抗癌活性成分的研究至今未见报道。在广泛筛选中草药抗癌活性的过程中,我们发现该植物的70%乙醇粗提物有很好的细胞周期抑制、细胞调亡诱导及一定的细胞毒作用。为此,我们对黑果黄皮的相关抗癌活性成分进行了研究。方法与结果:细胞周期抑制、细胞调亡诱导及细胞毒活性采用温敏型小鼠乳腺癌 taFT210细胞,用流式细胞术、细胞显微形态学特征观测、颗粒粒度分析法及 MTT 法进行检测。黑果黄皮茎皮的干燥碎块5公斤用70%的乙醇提取,得粗浸膏300克。该浸膏显示了很强的相关抗癌活性。因此,我们以细胞周期抑制、细胞凋亡诱导和细胞毒作用为活性指标,借助液液萃取、硅胶和 Sephadex LH20柱层析以及制备薄层层析等手段,追踪分离该浸膏中的活性成分,从中分得了5个咔唑类生物碱1、2、3、4和5。根据 ESI-MS、UV、IR、¹H及¹³C NMR 等谱学数据,特别是通过详细解析 PFG ¹H-¹H COSY、PFG-HMQC、PFG- HMBC 等2D NMR 谱和 NOE 差谱,这些化合物分别被鉴定为3-甲基 -2-甲氧基咔唑（1）、3-甲基咔唑（2）、Girinimbine（3）、Mahanimbine （4）和 Bicyclomahanimbine（5）。这些化合物均为首次从该种植物中分得。更多还原