人bcl-2基因高表达抑制低分化鼻咽癌细胞株(CNE-2)ANOIKIS

【作者】 朱振宇； 赵群； 邓诣群； 马涧泉；

【机构】 中山医科大学生物化学教研室；

【摘要】 目的:研究人 bcl2基因高表达能否抑制人低分化鼻咽癌细胞株(CNE-2)发生 Anoikis 效应及其相关机理。方法:将带有人 bcl -2的 cDNA 真核表达载体,用脂质体转染法导入 CNE-2细胞株中。用流式细胞仪根据免疫荧光定量法筛选高表达 bcl-2单细胞克隆株。用振摇及 polyheme 覆盖培养皿等方法防止细胞粘附,建立 anoikis 模型;抽提细胞 DNA 观察其是否发生片段化;用双染色法(YO-PRO -1/PI)检测细胞凋亡及其比例;用 Westem Blot 方法检测其 caspase3, PARP 等蛋白被激活情况。结果:成功转导人的 bcl-2基因到 CNE- 2细胞株中,并筛选出高效表达的单细胞克隆株。与对照 CNE-2细胞株相比,该细胞株有很强的抵抗由振荡及 poly-heme 等手段所诱导的 Anoikis。其 caspase3．PARP 等蛋白未见明显裂解。结论:bcl2在 CNE-2细胞株中的高效表达可显著抑制由振摇及 polyheme 等手段所诱导的 Anoikis。更多还原